Les solutions tampons résister aux changements de pH, car ils contiennent des conjugués de l'acide-base faible qui neutralisent les ions H + et OH-. Les solutions tampons sont constitués d'acides ou de bases faibles et le sel de cet acide ou de base. Le choix d'un système de tampon approprié dépend de la gamme de pH de tampon. La plupart des réactions biologiques se produisent dans un intervalle de pH de 6 à 8. Les tampons de tampon phosphate sur la plage de pH de 6,5 à 7,5. Des tampons d'acide carboxylique sont utiles pH de 3 à 6. tampons de borate de fonctionner à un pH de 8,5 10. Les tampons d'acides aminés tels que la glycine et l'histidine effectuer sur une diversité de gammes de pH. Tampon Tris est l'un des systèmes les tampons les plus couramment utilisés dans les laboratoires de biologie. Les calculs pour une solution de tampon Tris seront utilisés dans l'exemple suivant, mais la méthode applique l'une quelconque solution tampon.
Utiliser le produit de la molarité de la solution finale et le volume de déterminer moles de base requise. Par exemple, si deux litres d'une solution de tampon Tris 0,1 M sont nécessaires, le nombre de moles de Tris est nécessaire:
0,1 mole / litre x 2 litres = 0,2 mole de base Tris
Calculer la masse de tampon requis en multipliant le nombre de moles requis par le poids moléculaire de la base. Par exemple, la masse de 0,2 moles de base Tris est égale à:
0,2 mole Tris x 121.1 g / mole Tris = 24,22 g de Tris
Mesurer la masse appropriée de la base sur une échelle.
Dissoudre la base dans de l'eau distillée en utilisant une barre d'agitation magnétique et l'agitation plaque chauffante. Dissoudre dans un volume d'eau seulement légèrement inférieur au volume de la solution finale (950 à 975 mL pour chaque litre de solution finale). Le pH du tampon Tris change avec la concentration et doit réajustement si trop petit un volume initial est utilisé. Il est également préférable de préparer le tampon à la même température, il sera utilisé au cours de l'essai ou de l'expérience comme Tris a de grandes variations de température dépendant du pH.
Titrer la solution aqueuse acide avec du Tris 1 M chlorhydrique en utilisant un pH-mètre.
Porter la solution à son volume final avec de l'eau distillée dans une fiole jaugée.