Pourquoi est-sodium utilisé dans l'extraction de l'adn?

ADN - acide désoxyribonucléique - est une molécule dans le noyau d'une cellule qui contient l'information génétique. Extraction de l'ADN implique une série d'étapes pour briser doucement pour ouvrir la cellule, brisez la membrane nucléaire, séparer l'ADN à partir de protéines et ensuite amener à précipiter sur une solution. Ceci est réalisé à l'aide de divers produits chimiques, basé sur la structure des membranes, de l'ADN et son électronégativité. Le chlorure de sodium, ou d'autres composés contenant du sodium, sont utilisés pour stabiliser l'ADN après qu'il a été débarrassé de ses protéines et faciliter la précipitation.

La structure de l'ADN

  • La structure de base de l'ADN est deux longs brins de nucléotides enfilées avec des squelettes sucre-phosphate qui les entourent. ADN est en outre agencé en tournant et en enroulant sur lui-même, avec diverses protéines associées pour garder les brins organisés et démêlé. Dans son état natif, la partie de l'ADN le plus étroitement exposée à l'environnement est l'épine dorsale de sucre-phosphate. Au sein de la cellule, qui est essentiellement environnement dans lequel l'eau est soluble dans l'ADN. Il est soluble dans l'eau en raison de sa polarité globale.

ADN Polarité




  • "Polarité" est un terme décrivant la chimie des molécules qui contiennent une répartition inégale des charges électriques. Selon Paul Zumbo de Cornell Medical College, tous les acides nucléiques sont polaires. Dans le cas de l'ADN, les groupes phosphate fortement polaires sur le squelette portent des charges négatives. Cette propriété représente solubilité dans l'eau, car l'eau est aussi polaire. Les charges positives de l'eau d'interagir avec les charges négatives de l'ADN et de faire une solution. Pour récupérer l'ADN pour d'autres essais ou de visualisation, l'ADN doit être précipité à partir d'une solution avec de l'eau. Depuis l'eau a une charge positive relativement faible, cela est accompli en fournissant un ion chargé positivement fort dans la solution. Le sodium est le candidat parfait pour cela.

La précipitation d'ADN utilisant du sodium et de l'alcool





  • Une fois que l'ADN a été supprimé du noyau d'une cellule et qui se mélange à l'eau, l'introduction d'ions sodium crée une attraction temporaire entre le sodium et le squelette. L'ADN est temporairement neutralisé et ensuite facilement dissocié de l'eau. A ce stade, l'introduction d'un alcool oblige les ions d'ADN et de sodium à devenir encore plus étroitement liés, puisque l'alcool est très polaire. L'éthanol ou l'alcool isopropylique peuvent être utilisés. Une fois que l'ADN est dissocié de l'eau et étroitement lié au sodium, on précipite hors de la solution où il peut être concentré pour la purification ou visualisée par bobinage doucement autour d'une tige de verre lisse.

Autres étapes dans l'extraction de l'ADN

  • La décomposition de la membrane plasmique et la membrane nucléaire de l'ADN à partir de cellules d'accès est habituellement accomplie par l'introduction d'un premier détergent d'une certaine sorte de briser les molécules de lipides. Un détergent couramment utilisé dans les laboratoires est SDS, ou de sodium dodécyl Sulfate- mais pour les extractions simples, même savon peut être utilisé. Si les cellules sont dérivées de matières végétales, les enzymes sont également généralement ajoutés à digérer la paroi cellulaire.

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