Le but de l'électrophorèse

Définition

• L'électrophorèse est une technique empirique utilisé dans la séparation de molécules chargées (positifs et négatifs) de telle sorte que les cellules et les protéines en fonction de leur réponse en courant électrique.

  Plusieurs facteurs influent sur l'électrophorèse, y compris la charge nette, masse de molécule, tampon et les médias électrophorétiques comme du papier ou de gel. En électrophorèse, les molécules se déplacent vers le charge- opposée par exemple, une protéine avec une charge nette positive se déplacer vers le côté négatif du milieu électrophorétique. En outre, des molécules ayant une faible masse se déplacent plus vite ou plus vite que les molécules séparée avec grande masse.

Histoire

• En 1937, un scientifique suédois nommé Arne Tiselius développé un appareil pour mesurer le mouvement des molécules de protéine, appelée Moving Boundary appareil. Ceci est un dispositif en forme de U qui utilise un milieu aqueux pour séparer des molécules de protéines.

  
  
  
  
  

  En 1940, l'électrophorèse de zone a été introduit, qui utilise un support solide (par exemple, gel) et permet une meilleure résolution pour la coloration ou la visualisation de la séparation des molécules.

  Puis en 1960, l'électrophorèse capillaire a été développé pour fournir une technique d'électrophorèse polyvalent. Ce type d'électrophorèse permet la séparation des molécules en utilisant des milieux aqueux et solides.

Molécule de liaison

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  Électrophorèse, en utilisant des médiums, interagissent délibérément avec des molécules d'une manière non-invasive. Par exemple, des supports de gel se lient à des molécules de protéine sans perturber la structure et la fonction de la protéine. Après la liaison à des molécules, le mouvement ou la séparation est initiée en appliquant un courant électrique. En outre, il est également possible de récupérer les molécules liées au support après électrophorèse.

Haute résolution Séparation

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  L'électrophorèse est conçu pour visualiser la séparation des molécules. Ce résultat est obtenu par divers procédés, y compris la coloration et autoradiographie.

  Autoradiographie utilise films X-ray pour visualiser la position de molécules radioactives (par exemple, ADN) après la séparation. Ce type de visualisation est comparable à la prise de photos, dans lequel le x-ray est comme un flash d'appareil photo et le film x-ray est comme le film utilisé dans le développement de photos en noir et blanc. En électrophorèse, photos de molécules telles que les protéines dans le sang sont développés en utilisant une autoradiographie.

  En coloration, des colorants tels que le bleu de coomassie et amidoblack sont mélangés avec des molécules, avant ou après le processus de séparation. Par exemple, le mélange de protéines avec Coomasie colorant avant l'électrophorèse donnera chemins colorés (petits points ou lignes) montrant le mouvement des protéines lors de la séparation.

Analyse Quantitative

• Un autre but de l'électrophorèse est d'obtenir des informations quantitatives visualisation après la séparation de molécules. Pour obtenir des données quantitatives, par exemple, un logiciel d'analyse d'images (2D et 3D de rendu logiciel) enregistre les résultats de l'électrophorèse en tant que signaux numériques. Ces signaux représentent la position de avant et après l'électrophorèse et sont ensuite utilisés pour l'analyse quantitative »les molécules in silico» (avec l'utilisation d'un ordinateur).