Techniques d'hybridation d'adn

ADN, le matériel génétique de toute vie sur Terre, est une longue molécule, généralement double brin constitué d'une paire de squelettes sucre-phosphate à laquelle composés appelés bases nucléotidiques sont attachés. La séquence de bases sur un brin détermine la séquence complémentaire de l'autre, ou d'une sœur, brin. Hybridation de l'ADN est une méthode pour découvrir comment étroitement simples brins provenant de deux sources différentes et correspondent était une fois une technique importante pour juger de similitude entre les différentes espèces. Le sujet de controverse scientifique, la procédure d'hybridation originale a été quelque peu supplanté par de nouvelles techniques telles que le séquençage de bases d'ADN.

Préparation et évaluation




  • La première étape de l'hybridation d'ADN est de préparer un ADN simple brin par l'application d'un produit chimique alcalin à des échantillons d'ADN provenant de deux sources, appelée la sonde et la cible. Le préparateur étiquettes radioactivement l'ADN de la sonde et le mélange avec l'ADN cible. Finalement, les simples brins se rejoignent pour former un ADN double brin, qui est un hybride de la cible et la sonde brins. Le préparateur sépare l'ADN double-brin à partir des simples brins restants faisant passer le mélange à travers une colonne de minerai de phosphate qui permet seulement des simples brins de passer à travers. En chauffant lentement la colonne, l'ADN double brin dans la colonne sépare en simples brins, ou «fond», et tombe à travers. Le préparateur enregistre la radioactivité d'échantillons extraits à différentes températures et de graphiques les résultats. Espèces de sondes et de cibles étroitement liés devraient former des liaisons plus de complémentarité entre les brins et de révéler ainsi un point de fusion plus élevé que ne le ferait l'ADN des espèces apparentées moins. L'existence de séquences répétées d'ADN sur un brin peut fausser les résultats.

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